WHO istatistiklerine göre, son 40 yılda AIDS'ten 25 milyon insan öldü. Bu enfeksiyonun zararı çok büyük. Enfekte olanların çoğunun, bu enfeksiyonun geldiği Afrika'da olduğu ortaya çıktı. HIV ile hastalığın teşhisi özellikle alakalı hale gelir. Doğru, HIV için henüz bir tedavi yok, ancak erken tedavi hastanın ömrünü uzatabilir ve kalitesini iyileştirebilir.
HIV enfeksiyonunun teşhisi
HIV enfeksiyonu aşağıdaki yöntemlerle farklı aşamalarda belirlenir:
- ELISA - enzim immünolojik testi.
- Batı lekesi.
- PCR - polimeraz zincir reaksiyonu.
- Hızlı testler.
PCR yöntemi, 1983'te Nobel Ödülü'nü alan Amerikalı biyokimyacı Kary Mullis tarafından geliştirildi. Günümüzde tıpta bu yöntem, doğruluğu ve bilgi içeriği nedeniyle tüm enfeksiyonların tanısında önde gelen yöntem olarak kabul edilmektedir. HIV bu konuda bir istisna değildir.
Analizin özü
Her canlı hücre RNA ve DNA içerir. Bu nükleik asitler kendi kendini kopyalama ve kendini kopyalama yeteneğine sahiptir. Her enfeksiyon için DNA parçaları benzersizdir. ATbiyolojik sıvılarda, bu nükleik asit parçaları dolaşır. Reaktör - özel ekipman tarafından yakalanır ve tanınırlar. Bu yöntemin temelidir. Laboratuvar asistanı bu parçaları sayar. Retrovirüs HIV, RNA için izlenir. Viral parçacıkların tek kopyalarıyla bile, PCR onları algılayabilir ve sayabilir.
Venöz kan genellikle test sıvısı olarak kullanılır. Yöntemin özel bileşenleri virüs partiküllerine bağlanır ve bulunan fragmanlar çoğaldığı için onları tespit edilebilir hale getirir.
HIV durumunda, virüsün varlığının sonucu klinik ortaya çıkmadan çok önce elde edilebilir. Bu nedenle, yüksek duyarlılığı nedeniyle PCR, bu kadar yüksek bir tanı değerine sahiptir. Büyük bir PCR artısı, yöntemin çok yönlülüğüdür. PCR için enfeksiyonun kuluçka süresi bir engel değildir.
Araştırma maliyeti
PCR yöntemi oldukça pahalıdır. Bu onun büyük dezavantajlarından biridir. En son ekipmanı ve yüksek nitelikli laboratuvar asistanını gerektirir. Yukarıdakilerin ışığında, küçük yerleşim yerlerinde PCR teşhisi yapılmaz. Yalnızca uzmanlaşmış büyük kliniklerde test yaptırabilirsiniz.
Moskova kliniklerinde HIV DNA testinin maliyeti 2.800 rubleden başlar, viral yük (plazmadaki viral RNA) PCR ile belirlenir - 8.800 rubleden ve proteaz inhibitörlerine HIV direnci - 16.500 rubleden. Gördüğünüz gibi fiyatlar oldukça yüksek. PCR, MHI politikası kapsamında kamu kliniklerinde ücretsiz olarak yapılabilir. Önemli,işlemin isimsiz olarak yapılabileceğini söyledi. Kayıt defterinde hasta, sonucu öğrenebileceği bir numara alır. Modern tıp merkezlerinde bu verilerin girileceği müşterilerin kişisel hesapları vardır.
Araştırma hedefleri
HIV için PCR teşhisi şu durumlarda reçete edilir:
- Rahim içi enfeksiyonu belirlemek için hasta bir anneden veya taşıyıcıdan doğan bir çocukta enfeksiyon tespiti.
- ELISA şüpheli sonuçlar verdiyse (HIV için PCR bu durumda kesin tanı koymaya yardımcı olur).
- Vücuttaki virüsün nicel içeriğini tespit etmek için.
- Pozitif bir immünoblot ile PCR ile birbirlerini tamamlarlar.
- Bağışçıları test etme.
- HIV'in erken teşhisi için.
- ART'a karşı etkinliği ve direnci belirlemek için.
Bu analizin avantajı, HIV için PCR'nin bir yaşın altındaki çocuklar için bile uygulanabilmesidir.
Araştırma genellikle birincil tanı için değil, tedavi sürecinde yapılır. Birincil teşhis serolojik çalışmalardır (HIV'e karşı antikorların seviyesini belirlerler). Yanlış pozitif bir sonuç tekrarlanırsa, bu düşük viral yük ile olabilir.
PCR, HIV'e henüz antikor olmadığında teşhis koyar. Bu durumda ELISA yöntemi bir cevap vermeyecektir.
Ve HIV için PCR zaten pozitif olacak. Ancak bu HIV döneminin semptomları spesifik değildir. Hasta ilk olarak bir pratisyen hekim tarafından uzun süreli ve başarısız ARVI tedavisi görür. HIV tanısının yalnızca aşağıdakilere dayandığı akılda tutulmalıdır. PCR koyulmaz, diğer kapsamlı testlerden geçmek gerekir. PCR yöntemi genellikle zor durumlar için yardımcıdır.
Analiz için hazırlanıyor
HIV için PCR almadan önce, testten 2 gün önce yağlı yiyecekler, alkol tüketmemelisiniz. Ayrıca zihinsel ve fiziksel olarak zorlamamak daha iyidir. Hastaya bir immünostimülasyon kürü reçete edilirse, analizden 2 hafta önce durdurulur.
Kan en iyi sabah alınır. Vücudun diğer biyolojik sıvıları (sperm, vajinal salgı) da incelenebilir ancak en iyi materyal kandır. Tükürük, ter, idrar ve gözyaşı kullanılmaz çünkü içlerindeki virüs içeriği minimumdur.
HIV için PCR Artıları
Yöntemin avantajları, son derece düşük yanlış bir pozitif sonuç olasılığı, vücudun herhangi bir biyolojik sıvısı için reaksiyonun evrenselliğidir. Analiz geniş bir yelpazeye sahiptir:
- Farklı enfeksiyonları tespit etmek için bir kan alımı kullanılabilir.
- Teknik acil, sonuç hemen ertesi gün hazır.
- Güven %85 ile %98 arasındadır.
- HIV varlığı enfeksiyondan 10-14 gün sonra belirlenebilir (şu anda henüz antikor yoktur).
- Yaş sınırı yoktur, doğumdan hemen sonra yapılabilir.
Yöntemin eksileri
PCR'nin dezavantajları şunlardır:
- Analiz maliyeti.
- Gelişmiş tıbbi ekipman gerektirir.
- Yüksek nitelikli laboratuvar asistanı ve doktor gerektirir,alıcı analizi.
- Reaksiyon oldukça hassastır, bu nedenle hata %20 olabilir.
- Hastanın otoimmün süreçleri, onkolojisi, kronik enfeksiyonları varsa yanlış pozitif sonuca neden olabilir.
- Virüs havadan analize bulaşabileceğinden laboratuvar binasının özel temizliği gereklidir. O zaman sonuç yanlış olacaktır.
PCR yürüten laboratuvarlar için, teşhis kalitesini artırmak için, dahili kontrol için SanPiN sistemine göre özel katı önlemler geliştirilmiştir. Ayrıca, bu teknikle çalışmanın tüm kurallarına uyulmalıdır:
- Test tüplerindeki bilgilere kesinlikle uyulması zorunludur.
- Kan örneklemesinden önce tekrar bakın ve analizin planlandığından emin olun.
- Hemşire tüpleri doğru şekilde etiketlemelidir.
- Laboratuvar asistanı çapraz kontaminasyonu önlemek için biyomateryal ile tüm manipülasyonları doğru bir şekilde yapmalıdır.
- Test sistemi mükemmel kalitede olmalıdır.
Yalnızca tüm bu koşullar karşılanırsa cevaptaki hata bölümlerin yalnızca %2'si kadar olabilir.
Analiz süresi
Birçoğu, HIV için PCR'nin ne kadar sürede hazır olacağıyla ilgileniyor. Teşhis 8 saatten fazla sürmez. Hasta ertesi gün bir cevap alabilir. Ekspres test 2 saat içinde gerçekleştirilir.
PCR Güvenilirliği
Pek çok avantajına rağmen, PCR ideal bir tanı yöntemi olarak kabul edilmez. O durumda iletişime geçilirvücutta HIV varlığı için tarama testleri yaptırma ihtiyacı.
Analiz için kan ne zaman alınır?
HIV için PCR ne kadar sürer? İddia edilen enfeksiyondan 4-4 gün sonra kan alındığında zaten güvenilir bir sonuç alınabilir. 2 hafta sonra, HIV için güvenilirlik% 98 ve 5 günlük bir süre ile -% 80 olacaktır. HIV için PCR'de negatif bir sonucun varlığı güvenilir olacaktır, ancak kesinlikle doğru bir sonuç için ELISA da yapılır.
ELISA analizi ancak virüse karşı antikorlar varsa etkili olacaktır, bu süre 1-3 ay ile altı ay arasında sürebilir. ELISA daha yüksek bir olasılık verdiğinden (%98 -%99,9) PCR, HIV enfeksiyonunun varlığı için %100 doğrulayıcı bir test olarak adlandırılamaz. Ancak diğer yandan, antikorların ortaya çıkmasını beklemeniz gerekmeyen tek teknik budur.
HIV ile PCR, ART'nin etkinliği, HIV hastalığının evresi ve VN sayısı (vücutta HIV varlığının nicel bir değerlendirmesi) hakkında bilgi sağlayabilir. Bu, değişikliğin ciddiyeti ve kapsamı hakkında konuşacaktır.
Kanda antikorlar varsa HIV için PCR testi de gereklidir, ancak bunların varlığı klinik olarak HIV enfeksiyonunun güvenilirliğini göstermez.
Sadece enfeksiyon ve gündelik seks için test edilmezler. Diğer durumlar:
- Gebeliği planlama.
- Yaklaşan operasyon.
- Gündelik seks.
- Bazı meslekler işe giriş için bu testi gerektirir (öğretmenler, doktorlar ve diğer sağlık personeli).
- Mahkumlar.
- TB hastaları.
- Acil Durumlar Bakanlığı ve polis çalışanları.
- Egzotik ülkelerden tatilden döndü (eğer enfeksiyon olmadığından emin olmak istiyorsanız).
- Fahişeler.
- Yabancı öğrenciler.
- Uyuşturucu.
Ayrıca, bir hastadaki belirli semptomlar HIV testini zorunlu kılabilir:
- Ani kilo kaybı.
- 3 haftadan uzun süren ishal
- Uzun bir süre için makul olmayan yüksek sıcaklık.
- Şişmiş lenf düğümleri.
- Pnömoni, kandidiyaz vb.'nin açıklanamayan nedeni.
Analizin şifresini çözmek, laboratuvar asistanının değil, ilgilenen doktorun ayrıcalığıdır.
PCR veya ELISA, hangisi daha iyi?
HIV virüsü RNA'sının PCR teşhisi hem niteliksel hem de niceliksel olarak tespit edildiğinde. Bu analiz, çapraz reaksiyona giren birkaç patojen olsa bile belirli bir patojeni açıkça tanımlar. Biyolojik materyal kurutulmuş halde dahi kullanılabilir. Dezavantajı, PCR'nin yüksek hassasiyetidir, aletler veya bir test tüpü üzerinde çok az miktarda yabancı DNA bulunmasıyla bile yanlış pozitif sonuç verilebildiğinde.
ELISA'nın görevi ve olasılığı, bir retrovirüse karşı antikorların varlığını belirlemektir. Doğruluğu %99 olmasına rağmen erken aşamalarda uygulanamaz.
Nitel HIV testi
HIV için yüksek kaliteli PCR, virüsün vücuttaki varlığını belirler. Bu durumda sonuçlar şöyle görünecektir: pozitif, yanlış pozitif, negatif. Fakat bu çalışma retrovirüsün miktarı hakkında bilgi vermeyecektir. Böyle bir nitel analizHIV enfeksiyonu vücutta başka yollarla tespit edildiğinde uygun değildir.
Yüksek kaliteli PCR ile tedavinin etkinliğini kontrol etmek imkansızdır.
HIV ölçümü
Biyolojik bir üründeki virüs RNA'sının kopya sayısını saymak için yalnızca HIV bulaşmış kişiler tarafından gerçekleştirilir.
Böyle bir çalışmanın amacı, devam eden tedaviyi izlemek ve virüsün ona karşı direncini belirlemektir. Bu tür hesaplamalarda antiviral tedavi, bir doktor tarafından körü körüne reçete edilmez, bu nedenle daha etkili olacaktır. HIV enfeksiyonu için kantitatif PCR çok daha sık yapılır. Bu analiz bir kopya/ml kan olarak görüntülenir.
Hangi sonuçlar verilebilir:
- Virüs RNA'sı yok veya çok küçük (yaklaşık 20 kopya/ml). Kesin teşhis yok.
- 20'den 10'a kadar 6. derece kopya / ml - tanı güvenilirdir.
- 106 kopya/ml'den fazla - yüksek VN.
Laboratuvarlar, HIV için gerçek zamanlı PCR testi yapabilir. Bu, sonuçların otomatik olarak kaydedilmesiyle PCR ürünlerinin birikiminin gözlemlenmesi ve sayısal olarak değerlendirilmesi anlamına gelir.
