Hepatit C, bir veya daha fazla RNA molekülünden oluşan Flaviviridae HCV virüsünün neden olduğu karaciğer enfeksiyonudur. Kural olarak, bir hastada hepatit C'yi tespit etmek için bir dizi tanı önlemi alınır. PCR, tanıyı doğru bir şekilde doğrulayan bir analizdir. Genellikle, hasta hastalığın ilk belirtilerini zaten gösterdiğinde doktorlar tarafından sonuca varılır.
Hepatit C nedir
Kan veya cinsel temas yoluyla bulaşan bir viral enfeksiyonun yol açtığı karaciğer hasarına tıpta hepatit C denir. Neden olan ajan Flaviviridae ailesinden hücresel olmayan bulaşıcı ajanların RNA içeren bir virüsüdür. Enfeksiyon kendini göstermeden vücutta uzun süre kalabilir. Bu nedenle, yalnızca PCR RNA RNA kullanılarak bir kan testi kullanılarak bir mikroorganizma tespit edildiğinde, hepatit C (tanı olarak) haklı kabul edilir.
Flavivirüs, yapay olarak yetiştirilmiş izole hücrelerde üretilmez. Üreme sürecinde, bulaşıcı ajan, immünolojik olarak farklı modifikasyonlar yaratır. Bu faktörler vücudun vermesini engeller.uygun koruyucu tepki ve uzmanlar etkili bir aşı geliştirmekte zorluk çekiyor.
Virüs parenteral yolla bulaşır. Enfeksiyon için yeterli miktarda doğrudan kan dolaşımına girmelidir.
Hepatit C için hangi testler yapılır?
Karaciğerdeki viral patolojiler laboratuvar testleri kullanılarak teşhis edilir. Hepatit C'nin klinik çalışmaları, hastanın biyomateryalinde, özellikle kanda bulunan yabancı ve tehlikeli antijenler veya protein bileşikleri (antikorlar) incelenerek gerçekleştirilir.
- Enzimatik immünolojik test (ELISA). Yöntem, kandaki lgM antikorlarının saptanmasına dayanır. İmmünoglobulin en büyüğü olarak kabul edilir ve bir pentamerdir. Lenfositlerin bilinmeyen bir yabancı maddeye karşı birincil koruyucu tepkisinde kendini gösterir.
- Radyoimmunoassay (RIA) - iyodin etiketli bir radyoaktif izotopu kullanılarak lgM immünoglobulinin kantitatif tayini.
- Hepatit C'nin PCR'si - biyomateryalde (kan) viral RNA'nın belirlenmesi. Bu analiz, teşhisi güvenilir bir şekilde doğrular.
IgG testi güvenilir değil. Kan serumundaki varlığı sadece flavivirüsün varlığını değil, aynı patojene sahip başka bir geçmiş enfeksiyonu da gösterebilir.
PCR analizini ne belirler
Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR), araştırma için malzeme örneklerinde (epitel, kan) belirli patojenlere özgü DNA bölgelerinin tanımlanmasına dayanır. Analiz, biyolojik materyaldeki RNA veya DNA'larını tespit ederek patojenik en küçük organizmaları (virüsleri) tanımlamayı mümkün kılar.
Hepatit C PCR antikorlarının tespiti için laboratuvar prosedürü 3 aşamada gerçekleştirilir:
- Seç. İncelenen biyomateryal safsızlıklardan arındırılır ve kromatografik kolonun mobil fazında DNA elde edilir.
- Amplifikasyon. Analiz, cihaz termostat döngüleyicisinde gerçekleştirilir. Test tüplerini belirli bir döngü ile ısıtır ve soğutur. Bir çalışma için 35 döngüye kadar gerçekleştirilir. Sonuç, patojeni saptamak, tanımlamak ve değerlendirmek için yeterli sayıda DNA fragmanıdır.
- Elektroforez. Elde edilen parçalar, farklı agaroz doygunluğuna sahip bir jele yerleştirilir ve elektroforez yapılır. Elde edilen elektroferogram bir bilgisayarda analiz edilir.
Yalnızca standart PCR çalışması değil, Real Time PCR analizi de kullanılır. Bu gerçek zamanlı teşhistir. Yöntem, hastalığın oluşumunu ve dinamiklerini tanımlamayı mümkün kılan kalitatif ve kantitatif analizlere izin verir ve ayrıca patolojinin kökeninin nedenini ortadan kaldırmayı amaçlayan tedaviyi reçete eder. Gerçek zamanlı PCR, bulaşıcı ajanların saf kültürünü belirlemek için de kullanılır (genotipleme).
Polimeraz zincir reaksiyonu testi nasıl yapılır
Tanı için herhangi bir insan biyolojik sıvısı kullanılabilir. Hepatit C testi için biyomateryal genellikle kandır.
Teşhis için örnekleme, prosedürel olarak gerçekleştirilir.ofis. Kan almak için kanın pıhtılaşmasını engelleyen bir madde içeren tek kullanımlık test tüpleri kullanın. Enfeksiyöz ajanların yayılmasını önlemeye odaklanan faaliyetler, dışarıdan başka bir mikroorganizma türünün girmesini önlemeye yardımcı olur.
Hepatit C'nin PCR'si için kan sabahları aç karnına alınır. Numune hemen laboratuvara gönderilir. Biyomateryalin +4 ila +8 santigrat derece sıcaklıkta saklanmasına izin verilir. Konteynerler etiketlenir ve yol tarifleri verilir. Test sonuçları 48 saat içinde, bazen daha erken hazır olur.
PCR Türleri
Polimeraz zincir reaksiyonunun uygulama alanı oldukça geniştir. Enfeksiyon uzmanları, PCR hepatit B'yi, kan emici böcekler tarafından bulaşan hastalıkları, AIDS'i, tüberkülozu belirler. Onkolojide bu yöntemle tümör hücreleri erken aşamada tespit edilir.
Yaklaşık on dört analiz türü vardır. Bir veya başka bir türün kullanımı, analizlerin kapsamına ve nihai sonuçlarına bağlıdır. Sonucun 20 dakika içinde gerekli olduğu durumlarda bazı PCR türleri vazgeçilmezdir.
Hepatit C'yi teşhis etmek için 3 tip polimeraz zincir reaksiyonu kullanılır:
- Nitel değerlendirme, vücutta bir enfeksiyonun varlığını gösteren pozitif veya flavivirüs bulunmadığını gösteren negatif olabilir.
- Real-time PCR (kantitatif analiz) - IU/ml cinsinden patojenin kantitatif RNA'sını belirler.
- Genotipleme, virüsün türünü (genotipini) ortaya çıkaran bir analizdir.
Hastalığı doğru bir şekilde tanımlamak ve belirlemek, ardındanher üç tür çalışma da optimal tedaviyi reçete etmek için kullanılır.
Kalitatif polimeraz zincir reaksiyonu analizi
HCV'ye karşı antikor tespit eden bir ELISA'sı olan herkes için bir analiz zorunludur. Hepatit C için kalitatif PCR, standart duyarlılık testidir. Yöntem yalnızca algılamaya yöneliktir, diğer maddelerin sayımı veya izolasyonu yapılmaz.
Antikorları tespit etmek için, en az 50 IU/ml hassasiyet eşiğine sahip özel test sistemleri kullanılır. Antikorlar tespit edilirse, diğer açıklayıcı testler reçete edilir. Sonuç negatifse başka test yapılmayacaktır.
Bazı durumlarda, yetersiz laboratuvar personeli veya düşük kaliteli reaktifler nedeniyle yanlış negatif sonuç olabilir. Sigorta için, analizi başka bir yerde tekrar yapmak daha iyidir.
Kantitatif PCR
Yöntem, bir reaksiyon döngüsündeki flavivirüs sayısını doğrudan incelemek için kullanılır. Doğru ölçüm için hibridizasyon için kullanılan DNA parçaları veya floresan etiketli primerler kullanılır. SYBL Green boya kullanarak ekonomik bir algılama seçeneği vardır. Boya, DNA'daki küçük bir oyuğa sıkışır ve bir lazerle ışınlandığında maviye döner.
Konsantrasyon, cihaz-amplifikatör tarafından dijital eşdeğerde belirlenir. Değerler laboratuvarlar arasında biraz farklılık gösterebilir ve bu nedenle referans değerlerle karşılaştırılmalıdır.
Kantitatif PCRhepatit C, optimal ilaç dozajını seçmeye ve tedavi süresini belirlemeye yardımcı olur. Çalışmanın sıklığı, hastalığın evresine, genotip tipine ve öngörülen tedavi sürecine bağlıdır.
Genotip belirleme
Hepatit C virüsünün değişken bir genetik yapısı vardır. Çok sayıda değişiklik, bir aşı oluşturmayı imkansız kılar ve ayrıca tedaviyi karmaşıklaştırır. Toplam 11 genotip ve 100 alt tip tanımlanmış ve kaydedilmiştir. Eski SSCB ülkelerinde, hepatit C ile enfekte kişilerde PCR esas olarak 1b ve 3 genotiplerini tespit eder.
Genotiplerden herhangi birinin varlığında siroz veya karaciğer kanseri uçabilir. Bu yüzden virüsü zamanında tespit etmek çok önemlidir.
Bazı hastalar için HCV ile savaşmak üzere tasarlanmış bazı ilaçlar toksiktir. Genotipleme, protein türünü belirlemenize ve etkili bir ilaç yazmanıza olanak tanır.
Tıp testi sonuçlarında virüsün genotipini gösteren küçük Latin harfli bir sayı var. HCV saptanmış ancak tiplendirilmemişse, bu kişinin belirli bir coğrafi bölge için tipik olmayan bir genotipe sahip olduğu anlamına gelir.
Analiz sonuçları
Doktor sonuçları deşifre etmekle ilgilenir. Yalnızca birkaç çalışmadan elde edilen veriler (anamnez ve muayene ile birlikte) tıbbi geçmişin genel gerçek bir resmini verebilir.
- Sağlıklı bir insanda, biyomateryaldeki kalitatif reaksiyon testi hiçbir şey tespit etmez. "Tespit edildi" değeri belirtilirse, enfeksiyon onaylanır ve hastaileri teşhis ve ardından tedavi gerekiyor.
- Enfeksiyöz ajanların sayısının belirlenmesi, vücuttaki viral yükün değerlendirilmesini mümkün kılar. Normalde hepatit C kantitatif PCR patojeni tespit etmez. 810^5'e kadar bir gösterge düşük yük olarak kabul edilir ve uygun tedaviyle olumlu bir sonucu garanti eder. Daha yüksek değerler, kimsenin kefil olamayacağı olumlu sonuç için derinlemesine inceleme ve uzun vadeli tedavinin belirlenmesini gerektirir.
- Pozitif genotipleme sonuçları, hangi genotipin tanındığını gösterir. Negatif bir sonuç, ya bir flavivirüsün olmadığını ya da bu bölge için tipik olmayan bir genotipin varlığını gösterir.
Pozitif bir PCR testi neyi gösterir
Herhangi bir ciddi hastalık kapsamlı bir teşhis gerektirir. Pozitif bir hepatit C PCR tanıyı doğrular, ancak tahminler ancak ek laboratuvar ve enstrümantal çalışmalardan sonra yapılabilir.
Bir virüsün tespiti, patolojinin tam bir resmini vermez. Karaciğeri ve diğer organları nasıl etkilediğini belirlemek için türünü ve niteliğini belirlemek gerekir. HCV'nin erken tespiti genellikle olumlu bir terapötik sonuca sahiptir.
Pozitif ELISA ile negatif PCR
Karaciğer hasarının karakteristik semptomlarını gözlemlerken, enfeksiyonun zaten vücuda girmiş olma olasılığı yüksektir. Bu nedenle bir hepatolog veya enfeksiyon hastalıkları uzmanı ile görüşmelisiniz. Görüşmeler sırasında uzman bir anamnez alacak ve gerekli muayeneyi yazacaktır.
Eğerhepatit C PCR ile ilgili çalışmaların sonuçları negatiftir ve enzim immünoassay pozitiftir, bu kanda flavivirüs antikorlarının varlığını gösterir. Bu genellikle enfeksiyon vücuda az miktarda girdiğinde olur, bu nedenle bağışıklık sistemi bununla kendi başına başa çıkar. Ancak bu tür insanlar hala enfekte olarak kabul edilir ve her 6 ayda bir muayene edilmeleri gerekir. Bu tür test sonuçlarıyla bir kişinin ücretsiz tıbbi muayenesi reddedilirse, sağlığını korumak için bir ücret karşılığında PCR almak daha iyidir ve sonuçlar olumluysa teşhis ve tedavi için bir uzmana başvurun.
Yöntemin avantajları ve dezavantajları
Hepatit C tanısını koyarken PCR'nin çeşitli avantajları vardır:
- Patojenin erken tespiti.
- Virüsün doğru tanımı.
- Tanılamanın verimliliği.
- Minimum hata oranı.
- Yüksek hassasiyet.
Yöntemin dezavantajları:
- Yüksek analiz maliyeti. Test pahalı ekipman, reaktifler ve yüksek nitelikli tıbbi personel gerektirir. Hep birlikte hatırı sayılır bir tutar.
- Biyomalzemenin taşınması için katı gereksinimler.
Karaciğer iltihabı tedavisi
Hepatit C virüsü için PCR analizi, tanı için temel kabul edilir, ancak kesin değildir. Terapinin etkili olması için bir dizi ek laboratuvar ve enstrümantal çalışma gereklidir. hepsini geçtikten sonrateşhis önlemleri doktor tedaviyi reçete eder:
- Diyet 5 reçete edilir.
- Alkol tamamen hariç tutulmuştur.
- 25 gün boyunca Interferon ve Ribavirin'in ortak alımı.
- Hepaprotektörlerin kursları "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- Özel durumlarda ayrık plazmaferez kullanılır.
Hepatolog tarafından reçete edilen ilaçlar, dozajını değiştirmeden düzenli olarak kullanılır. İlaçların kullanım süresi kontrol testlerinden geçtikten sonra doktor tarafından belirlenir. Terapi sürecini tamamladıktan sonra altı ayda bir doktora gitmelisiniz.
PCR-diagnostics, hepatit C'ye neden olan ajanın erken bir aşamada belirlenmesini sağlar. Bu, tedavinin etkinliğine ve hastalığın siroz ve hepatoselüler karsinom gibi tehlikeli formlara geçişinin önlenmesine katkıda bulunur.
